Анализ на хламидии – диагностика хламидиоза

Кого в первую очередь желательно проверить на хламидиоз?

Есть люди, которые рискуют заболеть этим недугом больше, чем все остальные. К ним в первую очередь относятся:

  • Женщины и мужчины, ведущие беспорядочную половую жизнь.
  • Половые партнеры людей, у которых был диагностирован хламидиоз. Важно знать, что у болезни часто бывает бессимптомное течение.
  • Женщины, которые не могут забеременеть больше 2 лет. Даже при отличных анализах полового партнера.
  • Женщины, страдающие эрозией шейки матки, цервицитом, воспалительными процессами в органах малого таза. Результат влагалищного мазка не всегда может дать положительный результат.
  • Беременные женщины, у которых возникают проблемы со здоровьем при вынашивании ребенка. Те из них, у кого были самопроизвольные выкидыши или преждевременно начавшиеся роды, многоводье, повышенные температурные показатели без видимых на то причин находятся в группе риска.

Основными причинами, по которым человеку стоит сдать анализы на хламидиоз, являются:

  • острое или хроническое воспаление: мочеиспускательного канала, шейки матки, влагалища, прямой кишки, конъюнктивы глаза, ротоглотки, легких (пневмония или бронхиолит — у детей);

  • подозрение на бытовое или половое заражение хламидиозом — даже если симптомов при этом нет (бессимптомная форма);

  • беременность, при ее осложнениях: воспаления шейки матки, влагалища, мочеиспускательного канала, при болях в животе.

  • более серьезные проблемы с беременностью: выкидыш, замершая беременность, другие выкидыши в прошлом;

  • бесплодие.

Методы лабораторной диагностики хламидиоза — ПЦР у женщин и мужчин

… по разным данным, от 5 до 15 % молодых сексуально активных людей поражены хламидийной инфекцией.

Хламидии (Chlamydia ) — мелкие грамотрицательные кокковидные бактерии размером 250-1500 нм (0,25-1 мкм). Они имеют все основные признаки бактерий: содержат два типа нуклеиновых кислот (ДНК и РНК), рибосомы, мурамовую кислоту (компонент клеточной стенки грамотрицательных бактерий), размножаются бинарным делением и чувствительны к некоторым антибиотикам.

Семейство Chlamydiaceae (входящее в порядок Chlamydiales ) является облигатными внутриклеточными бактериями, которые имеют две формы жизни (элементарные и ретикулярные тельца), сходный двухфазный цикл развития (состоящий из чередования различных форм — элементарного тельца и ретикулярного тельца), обладают склонностью к персистенции (или к латентному (скрытому) существованию).

Согласно новой международной классификации имеется четыре семейства и 5 родов хламидий. В каждом роде представлено от одного до шести видов, отличающихся между собой по ряду фенотипических признаков.

Рассмотрим наиболее значимые (патогенные) для человека виды хламидий (не погружаясь в эту тонкую и сложную классификацию). (1) Chlamydia psittaci. вызывает у человека атипичную пневмонию, энцефаломиокардит, артрит, пиелонефрит, энцефаломиокардит (эта хламидия является абсолютным зоонозом, то есть, инфекция передается человеку от животного;

встречается только у человека и вызывает широчайший спектр болезней, включая урогенитальные заболевания, конъюнктивиты, некоторые формы артритов (серотипы хламидий, вызывающие поражение урогенитального тракта передаются от человека к человеку при половом контакте).

Особенностью хламидий является то, что они развиваются только в эпителии особого типа, в так называемом призматическом (цилиндрическом) эпителии, поэтому поражаются органы, покрытые этим эпителием.

Chlamydia pneumonia и Chlamydia psittaci, поражая эпителий дыхательных путей, прежде всего бронхов, вызывают хронические, реже острые, бронхиты и пневмонии («воспаление лёгких»).

Chlamydia trachomatis же, повреждая слизистую оболочку уретры, канала шейки матки, маточных труб приводит не только к острым воспалительным процессам, но и к хронизации с последующими осложнениями, наиболее грозным из которых является бесплодие

Многочисленные клинико-эпидемиологические исследования свидетельствуют о широком распространении хламидийной инфекции. Сегодня хламидийная инфекция прочно заняла второе место после пневмококка в спектре возбудителей пневмоний, которые нередко имеют тенденцию к хронизации и тяжелому течению с летальными исходами.

50–80% случаев нарушения репродуктивной функции у женщин обусловлены инфекционными поражениями, среди которых хламидийные встречаются наиболее часто.

Клиническую диагностику хламидиоза затрудняют длительное бессимптомное течение, нехарактерные клинические проявления, неэффективность иммунохимических и серологических методов анализа, дороговизна, длительность и трудоемкость микробиологического метода.

ТЕХНИКА ВЗЯТИЯ МАТЕРИАЛА

Прежде чем рассматривать методы лабораторной диагностики хламидийной инфекции, необходимо рассмотреть технику взятия материала, поскольку данная процедура входит один из самых ответственных этапов диагностики хламидиоза – этап забора материала.

При исследовании на хламидии методом заражения культуры клеток перед взятием материала больные не должны принимать в течение месяца антибиотики тетрациклинового ряда;

Анализ на хламидии – диагностика хламидиоза

при цитологической методике, в том числе и при использовании моноклональных флюоресцирующих антител, антибиотики не следует применять за две недели до исследования.

При взятии материала на хламидии следует помнить. что оптимальным для присутствия и размножения хламидий являются определенные участки цилиндрического эпителия мочеполовых путей (передняя уретра на глубине 2,5-4 cм у мужчин, слизистая оболочка цервикального канала матки на глубине 1,5 см у женщин).

При взятии материала из шейки матки ключевым моментом является удаление слизистой пробки. От тщательности проведения этой подготовительной процедуры во многом зависит правильность соскоба клеток цервикального канала.

Слизистую пробку удаляют ватным тампоном и пинцетом, а затем берут материал специальной щеточкой cervex brush или voba-brush, имеющей ряд преимуществ, так как для получения репрезентативного результата важно присутствие в образце клеток со всей поверхности цервикального канала, зоны трансформации.

Забор материала у девочек производится со слизистой оболочки преддверия влагалища, в отдельных случаях — из заднего свода влагалища через гименальные кольца.

ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ

Цитоскопические методы. При цитоскопическом методе одновременно с поиском цитоплазматических клеток-включений Гальбершедтера-Провачека учитывается количество лейкоцитов как показателя воспаления, а также дополнительная информация о наличии сопутствующей бактериальной микрофлоры, дрожжеподобных грибов, трихомонад и т.п.

Цитоскопический метод широко доступен, но эффективен лишь при острых формах инфекции, значительно менее эффективен и информативен при хронических формах заболевания.

Иммуноморфологические методы. Эти методы основаны на обнаружении антигенных субстанций хламидий в эпителии и других тканях путем обработки препаратов антителами.

Антитела диагностической антихламидийной сыворотки соединены с какой-либо меткой — люминесцирующей (ФИТЦ-антитела) или ферментной (энзим-меченые антитела).

Прямая иммунофлюоресценция (ПИФ). Этот метод предусматривает прямое выявление антигенов хламидий. При люминесцентной микроскопии хламидийные включения определяются в виде образований в клетке эпителия с зеленой или желто-зеленой флюоресценцией на коричнево-оранжевом фоне цитоплазмы клеток.

Включения могут иметь зернистую, гомогенную или смешанную структуру. Диагностическая информативность ПИФ связана с тем, что с ее помощью выявляются не только корпускулярные, но и растворимые антигены хламидий.

Непрямой метод иммунофлюоресценции. Непрямой метод иммунофлюоресценции применяют в тех случаях, когда нет в наличии ФИТЦ-конъюгата антихламидийных антител.

Анализ на хламидии – диагностика хламидиоза

В этих случаях приготовленный тем же методом, что и для ПИФ препарат из клинических проб обрабатывают вначале антихламидийными антителами, полученными путем иммунизации хламидиями овец, кроликов, мышей или других животных, а затем второй сывороткой, специфичной для вида животного, которое было иммунизировано хламидиями. Антитела второй сыворотки конъюгированы с ФИТЦ.

Методы иммуноферментного анализа. Эти методы основаны на обнаружении растворимого антигена хламидий в исследуемых пробах. Чаще всего в клинической практике применяются наборы реагентов, основанные на методе твердофазного ИФА-анализа для определения антигенов хламидий.

Твердая фаза покрыта хламидийными моноклональными антителами установленной специфичности. Амплификация достигается с использованием технологии полимерной конъюгации, в результате чего происходит фиксация, при которой на каждый связанный участок антигена приходится полимерный комплекс с высокомолекулярным фрагментом.

Кроме того, амплификация выполняется на стадии обозначенного воспроизведения с использованием запатентованной технологии фермент-амплификации. Визуально положительные пробы окрашиваются в желто-оранжевый цвет.

Интенсивность окраски пропорциональна количеству антигена хламидии. Точный результат исследования определяют с помощью специальных аппаратов для ИФА.

Выделение хламидий в культуре клеток МсСоу. Одним из лучших, но в то же время наиболее трудоемким, является метод диагностики хламидий путем выделения возбудителя в культуре клеток, обработанных различными антиметаболитами («золотой стандарт»).

Для этой цели обычно используют чувствительную культуру клеток, обработанную циклогексимидом. Чувствительность культурального метода по сравнению с ПЦР составляет 70-80%, но в то же время он превосходит молекулярно-биологические методы диагностики по специфичности.

Культуральный метод является референс-методом при оценке эффективности антибактериального лечения. При исследовании биопроб методом ПЦР после курса химиотерапии в некоторых случаях можно получить «ложноположительные с клинической точки зрения» результаты.

Это связано с тем, что невозможно однозначно оценить жизнеспособность и патогенность микробной клетки на основании выявления фрагмента ее генома, используя только данные молекулярно-биологических методов.

В этом случае при исследовании клинического материала с помощью культурального посева микробные клетки, потерявшие эти важные с клинической точки зрения свойства, не дадут роста в клеточной культуре.

Диагностика методом полимеразой цепной реакции (ПЦР). Экстремально высокие показатели чувствительности и специфичности ПЦР делают эту методику во многом революционной в лабораторной диагностике, но, несмотря на это, особое внимание при его использовании следует уделять, без сомнения, вопросам правильной интерпретации получаемых результатов.

Основными мишенями при выявлении хламидии трахоматис методом ПЦР являются нуклеотидная последовательность видоспецифической криптической плазмиды, последовательность генома главного белка внутренней мембраны, рибосомальные гены.

Как диагностировать хламидиоз?

Хламидии – особый вид микроорганизмов, занимающих промежуточное место между бактериями и вирусами. Они относятся к внутриклеточным паразитам, размножающимся в клетках слизистых оболочек мочеполовой системы.

Уничтожая зараженные клетки, хламидии становятся источником постоянного воспаления, вызывают снижение иммунитета и развитие различных заболеваний мочеполового тракта.

У мужчин хламидиоз чаще всего протекает бессимптомно, ухудшая общее самочувствие больного и увеличивая риск развития других заболеваний половых органов.

У каждого метода есть свои особенности, а некоторые вообще нельзя назвать эффективными. Поэтому давайте выясним, что подходит для определения хламидиоза, а что не стоит принимать всерьез.

хламидии

Это один из самых надежных анализов на хламидии. Он обнаруживает бактерию с почти 100% точностью.

ПЦР выявляет хламидии по их частицам — ДНК chlamydia trachomatis (хламидии трахоматис), как правило, в соскобе. ДНК — это крошечная молекула, которая несет в себе генетическую информацию о бактерии.

Если в организме есть даже небольшое количество хламидий, то анализ без труда вычислит их по ДНК. Поэтому ПЦР является анализом № 1 в диагностике хламидиоза.

ПОДРОБНЕЕ ПРО:  Свечи Лонгидаза при бесплодии: в чем эффективность, отзывы

Для ПЦР обычно берут соскоб клеток слизистой или выделения из органа, в котором подозревают наличие хламидий. Соскоб могут брать с конъюнктивы глаза, из уретры, прямой кишки, канала шейки матки, задней стенки горла.

У ПЦР есть и небольшой недостаток: по нему нельзя точно сказать, живые или погибшие хламидии обнаружены в организме. Например, если сделать анализ слишком рано после курса антибиотиков (раньше, чем через месяц), он может показать хламидиоз у того, кто на самом деле успешно от него пролечился.

Важно знать, что и отрицательные результаты ПЦР не означают, что болезни нет. В 2-10% случаев анализы ошибаются. В этом случае стоит провести дополнительное исследование, особенно если у человека есть явные признаки хламидиоза.

Это анализ, который хорошо распознает антитела к хламидиям в крови. В среднем его эффективность составляет 70%. ИФА всегда идет бок о бок с ПЦР и дополняет его.

С помощью ИФА исследуют иммуноглобулины — антитела к хламидиозу. Это защитные белки, которые вырабатываются в крови, когда хламидии внедряются в тело человека и начинают активно размножаться.

Диагностика хламидиоза

Антитела, возникшие специально для борьбы с хламидиями, называются Anti-Сhlamydia trachomatis IgG/IgA/IgM. Кроме этого ИФА может находить антитела и против других видов хламидий — например, к chlamydia pneumoniae (хламидия пневмониэ) IgM и IgG.

По присутствию антител, а также по их количеству можно понять: есть ли у человека хламидии и какой стадией хламидиоза (острой или хронической) он болен.

Однако использовать метод ИФА как единственный не стоит — по его результатам тоже не всегда понятно, болеет ли человек хламидиозом сейчас или переболел в прошлом.

По присутствию и количеству антител к хламидиям в крови можно понять: есть ли у человека хламидиоз и какой стадией он болен

Микрофотография: хламидии во время анализа культуральным методом

Этот анализ на хламидиоз тоже очень точный — до 100%, но при этом столь же трудоемкий, дорогой и долгий (результатов ждут от 6 до 8 дней).

Для посева мазок, взятый у больного, помещают в специальную питательную среду. Для хламидий такая среда — это искусственно выращенный слой человеческих клеток.

Из-за стоимости и долгого ожидания бак посев на хламидиоз используют довольно редко. Обычно к посеву рекомендуют прибегать в случае:

  • медико-правовых конфликтов;
  • диагностики хламидиоза у девочек до наступления месячных;
  • подозрения на хламидиоз в ротоглотке или прямой кишке.

Это прямая реакция иммунной флюоресценции. Это далеко не самый точный анализ на хламидии — вероятность ошибки в нем составляет целых 50%.Вот в чем суть метода.

Особый состав, в котором есть окрашенные антитела к хламидиям, наносят на клетки, взятые со слизистой пациента (соскоб). Антитела, окрашенные светящимся веществом — флюорохромом, — прочно соединяются с хламидиями. Затем остатки краски смывают.

Если в мазке имеются хламидии, то благодаря соединению с окрашенными антителами, они подсвечиваются (флюоресцируют). В итоге в мазке под микроскопом и на микро-фото хламидии выглядят как маленькие зеленые звездочки.

По большому счету, ПИФ нельзя рекомендовать ни как основной, ни даже как дополнительный анализ на хламидии. Если человеку предлагают пройти этот тест, лучше сделать выбор в пользу ИФА, ПЦР или бак посева.

Венерологи в Москве

Записаться на прием

Воротникова Ирина Валентиновна
Венеролог, Дерматолог, Уролог
509 отзывов
Цена: 1500 руб.
Рейтинг: 9.5/10

Записаться на прием

Конте Мария Гавриловна
Венеролог, Дерматолог
5 отзывов
Цена: 1500 руб.
Рейтинг: 9.5/10

Записаться на прием

Хейдар Сюзанна Абдуловна
Венеролог, Дерматолог, Трихолог, Миколог
160 отзывов
Цена: 2000 руб.
Рейтинг: 9.5/10

Все венерологи Москвы »

С помощью этого анализа можно обнаружить хламидий, но точность метода очень низкая — хламидиоз определяют лишь в 10-12% случаев.

В этом случае исследуют соскоб клеток слизистой пациента. Метод Романовского-Гимзе позволяет окрасить человеческие клетки и их «начинку» — хламидий, которые прячутся внутри. За счет этой технологии они становятся видны под микроскопом.

Вдобавок к низкой точности метод работает лишь при острой форме хламидиоза — когда бактерии внутри клеток не покрыты защитной оболочкой и видны при окрашивании. Если хламидиоз перешел в хроническую стадию, анализ вообще бесполезен.

Тест на хламидии по Романовскому-Гимзе редко предлагают в частных клиниках и лабораториях. В основном, его могут назначить в государственных мед учреждениях — поликлиниках или КВД.

Важно помнить, что этот способ очень ненадежен. Если есть выбор, лучше воспользоваться более точными методами.

Этот метод вообще не может обнаруживать хламидий — поэтому очень важно отличать его от других, чтобы не делать бессмысленный анализ.

Микроскопия мазка — это анализ выделений человека (вагинальной слизи, спермы и других) под микроскопом с помощью другого окрашивания — по методу Ганса Грама.

Окрашивание по Граму позволяет увидеть разные бактерии, которые без краски незаметны под микроскопом. Также он помогает посчитать лейкоциты — вид иммунных клеток человека. Но увы:

Методы диагностики хламидиоза

В итоге микроскопия мазка по Граму показывает, в каком соотношении другие микроорганизмы населяют тот или иной орган. Также по ней можно установить, есть ли в этом органе воспаление и насколько оно сильное.

Но сам хламидиоз с помощью этого теста установить никак нельзя! Ведь есть воспаление или нет, это ничего не говорит о хламидиях. Подробнее о том, в каких случая возникает воспаление при хламидиозе, читайте в специальной статье.

Анализ годится только в качестве дополнительного — чтобы оценить общее состояние конкретного органа, или при подозрении на другие заболевания.

Хламидиоз с помощью микроскопии мазка по Граму установить никак нельзя!

Этот метод полностью бесполезен. Про него стоит знать, только чтобы не выкидывать деньги на ветер.

Анализ можно купить в аптеке и провести самостоятельно в домашних условиях. По механизму действия он очень схож с тестом на беременность: в лунку наносится несколько капель мочи или слизи из вагины, затем результат оценивают по числу полосок.

В инструкции говорится, что, если у человека есть хламидии, тест покажет две полоски.

Однако отрицательный результат теста совсем не гарантирует, что болезни нет на самом деле. Положительный, впрочем, тоже недостоверен. По сути, анализ не сообщает ничего полезного. Поэтому при подозрении на хламидиоз разумнее сдать более точные анализы.

Достовер-

ность

Материал Цена*
ПЦР

Высокая

(90-100%)

Мазок или соскоб, моча

250-

300р

ИФА

Средняя

(70-80%)

Кровь

450-

500р

ПИФ

Средняя

(70-80%)

Соскоб

350-

400р

Посев

Высокая

(90-100%)

Мазок или соскоб

900-

1000р

Мини-тест

Низкая

(20-30%)

Моча, мазок

300-

360р

Микроскопия по

Романовскому-Гимзе

Низкая

(10-12 %)

Соскоб

450р

Микроскопия

по Граму

Нет

(не определяет

наличие хламидий)

Мазок

300-

450р

Результаты анализов

Анализ Сроки Результат
ПЦР 1-2 дня

«—» — ДНК хламидий не обнаружено;

« » — ДНК хламидий обнаружено.

ИФА 2-3 дня

«—» (КП** ≤ 0,9) — Антитела не обнаружены;

« / — » (0,9 {amp}lt; КП {amp}lt; 1,1) — сомнительно — низкое количество антител;

« » (КП ≥ 1,1) — антитела обнаружены;

ПИФ 2-3 дня

«—» — антигены хламидий не обнаружены;

« » — антигены хламидии обнаружены;

Посев 6-8 дней

«—» — нет роста хламидий;

« » — есть рост;

Мини-тест 10 минут

Две полоски « » – хламидиоз установлен;

Одна полоска «—» – хламидиоз не установлен;

Микроскопия по Романовскому-Гимзе 2-3 дня

«—» – включения в клетках хламидий не обнаружены;

« » – включения хламидий в клетках не найдены;

Микроскопия по Граму 2-3 дня

Умеренное и большое количество лейкоцитов (от 10 до 50 в п/зр.), а также большое, значительное и массивное количество бактерий (от 100 до 1000 и более в п/зр. или — ) – оценивается, как воспаление

*Многих беспокоит, сколько же стоит тот или иной анализ на хламидиоз. В зависимости от лаборатории и вида анализа, диапазон цен колеблется от 90р до 2500р.

Какой материал берут для анализа на хламидии?

Для исследования на хламидии подходят самые разные биологические материалы организма: выделения из влагалища, соскоб или мазок со слизистой, сперма, моча, кровь… В зависимости от симптомов и формы болезни, страдают различные органы и ткани, поэтому материал берут из той области, в которой подозревают инфекцию.

  • соскоб или мазок из мочеиспускательного канала;
  • из канала шейки матки;
  • из ротовой полости и глотки;
  • из анального канала и прямой кишки;
  • из больших преддверных и околомочевых желез;
  • из слизистой оболочки конъюнктивы глаза;
  • также сдают анализ мочи и кровь на хламидии;
  • соскоб или мазок из мочеиспускательного канала;
  • из прямой кишки;
  • из ротовой полости и глотки;
  • из конъюнктивы глаза;
  • мочу и кровь.
  • соскоб или мазок из наружного отверстия мочеиспускательного канала;
  • из преддверия влагалища;
  • просто из влагалища;
  • из прямой кишки;
  • из ротовой полости и глотки;
  • из конъюнктивы;
  • и при использовании детских гинекологических зеркал — из канала шейки матки.

Конечно, есть разница в том, как берут анализы на хламидии у женщин и мужчин — но сами типы процедур будут одинаковыми. На анализы можно брать кровь, а можно проводить микробиологические исследования на хламидии — изучать выделения и клетки человека под микроскопом.

Мазок — это частицы выделений, которые собирают со слизистых оболочек пациента специальной щеточкой. В мазке содержатся разные бактерии, иммунные клетки человека и другие компоненты.

Чтобы выявить именно хламидиоз, мазок чаще всего исследуют с помощью ПЦР или бактериологического посева. Обычное исследование мазка под микроскопом не определяет возбудителя этой болезни. Сдавать мазок на анализ совершенно не больно.

Микрофотография: клетки в мазке при хламидиозе во время анализа по Романовскому-Гимзе

Соскоб — это процедура, при которой берут самые верхние клетки слизистой (канала шейки матки, прямой кишки, глаз, уретры). На материале соскоба проводят более серьезное лабораторное исследование.

В результате специалист может изучить уже не выделения, а сами клетки слизистой оболочки. Если внутри этих клеток есть хламидии, их будет видно. Соскоб на chl trachomatis исследуют с помощью флуоресцентной микроскопии (ПИФ), микроскопии по Романовскому-Гимзе и определения ДНК (ПЦР). Сдавать соскоб на хламидии неприятно, но тоже не больно.

В моче хламидии могут содержаться, если они поразили мочеиспускательный канал. Для анализа необходима первая утренняя порция мочи в (примерно 20-30 мл.). Основной метод исследования мочи на хламидии — это ПЦР.

В крови могут содержаться и косвенные признаки хламидий — антитела к ним; а иногда — и сами хламидии, если инфекция попала в кровоток. Специальной подготовки, чтобы сдать анализ крови на хламидии не требуется.

Правильнее всего сдавать кровь на голодный желудок, или хотя бы спустя 4 часа после еды. Антитела исследуются с помощью ИФА, а сами хламидии — с помощью ПЦР.

Если в крови обнаружены сами хламидии — важно понимать, что это серьезное состояние. Из кровотока бактерии могут попасть в любой орган, где есть слизистые оболочки, и начать там размножаться.

Чтобы результаты анализов были достоверны, требуется не только опыт врачей и лаборантов, но и ответственность самих пациентов: есть правила, которые нельзя нарушать.

Хламидиоз

Обследование на хламидиоз нужно проводить до того, как человек начал принимать антибиотики. Причина в том, что антибактериальные препараты убивают хламидий или «загоняют» в скрытую форму.

Значит, обнаружить бактерии после такого лечения будет очень трудно. Если человек принимал любые антибиотики за несколько дней до сдачи анализов (например, лечил ангину), то первый тест рекомендуется сдавать только через месяц после приема последней таблетки.

  1. Если пациент ранее лечился местными антибактериальными препаратами (мазями, кремами, растворами антисептиков), то первый анализ рекомендуется сдавать только через 2 недели после лечения.

  2. Cдавать материал из мочеиспускательного канала (слизь/мочу) как мужчинам, так и женщинам нужно либо до мочеиспускания, либо через 3 часа после него.

  3. Анализ на хламидиоз у женщин проводят между менструациями: не позже, чем за 5 дней до менструации, или не раньше, чем через 5 дней после нее. Желательно, чтобы материал для анализа брали в первую половину цикла. Однако, если у женщины есть признаки сильного воспаления, то имеет смысл сдать анализ как можно быстрее, исключая только период самой менструации. За день до анализа нельзя проводить никакие спринцевания влагалища.

  4. УЗИ), мужчинам — в уретру.

  5. Беременные женщины сдают анализы по тем же правилам, что и женщины, не ожидающие ребенка. Разумеется, на них не распространяются ограничения, связанные с менструальным циклом.

Когда все результаты анализов приходят положительными, поставить диагноз нетрудно. Но как быть, если они противоречат друг другу? Строгих схем для диагностики хламидиоза нет.

Среди большого разнообразия лабораторных методов важно знать, как правильно провериться на хламидиоз. Пожалуй, основное правило: к диагностике хламидиоза нужно подходить комплексно — использовать несколько видов анализов и сопоставлять их результаты.

Из существующих анализов разумнее выбирать самые точные — ПЦР, ИФА и бактериальный посев. Те же анализы хорошо подойдут и для оценки результатов лечения.

назад к разделу «Хламидиоз»

Этот метод помогает только в случаях острых форм недуга и имеет точность определения урогенитального хламидиоза около 12%. Следует учитывать, что хламидии являются внутриклеточными паразитами, поэтому обычного мазка для их определения недостаточно.

Необходим соскоб из пораженного органа. Это может быть влагалище, шейка матки, простата, уретра, глаза. Соскоб окрашивается специальным веществом, что дает возможность заметить хламидию под микроскопом.

Данный метод помогает напрямую определить наличие антигенов хламидий. Для этого исследуемый материал нужно обработать специальными антителами, которые, в свою очередь, были подвергнуты обработке флуоресцирующим препаратом.

Chlamydia trachomatis

Он не в состоянии распознать хламидии напрямую. С его помощью выявляются антитела к ним. У этого метода есть свои преимущества. Он определяет возбудителя недуга, стадию его развития, а также эффективность терапии.

Диагностика хламидиоза – сложный процесс. Так как возбудитель обитает в клетках, то для диагностики в первую очередь берут соскоб эпителия с больного органа.

Дополнительно доктор может назначить анализы мочи и крови, результаты которых часто оказываются нужными источниками для правильной постановки диагноза.

Для выявления хламидиоза проводят следующие лабораторные исследования, доступные для взрослых и детей:

  • экспресс-тест;
  • общий мазок (цитоскопический анализ);
  • реакция иммунофлюоресценции;
  • микробиологический (культуральное исследование);
  • иммуноферментный анализ;
  • полимеразная цепная реакция.

Экспресс-тест

Этот анализ представляет собой использование диагностической тест-системы, которую можно купить в аптечном пункте и выполнить испытание дома, самостоятельно.

Данная система основана на принципе иммунохроматографии. На специальную индикаторную полоску наносят извлеченные из половых органов слизь или мочу. Когда исследуемая жидкость достигнет зоны на полоске, где расположены чувствительные к возбудителю антитела, при наличии антигена происходит взаимная реакция, и индикатор окрашивается в красный цвет.

экспресс-тест

Такой аптечный тест в короткие сроки в домашних условиях определяет наличие хламидий. Этот метод анализа полезен при первых подозрениях на заражение (зуд, выделения из половых органов и неприятный запах, кровь в моче), лицам с активной половой жизнью и для беременных (первый триместр).

Тест рекомендовано делать с утра или собирать мочу, перед этим воздержавшись от мочеиспускания на пару часов. Перед сбором анализа нельзя подмываться и наносить какие-либо средства на половые органы.

Данный вид анализа ненадежен (вероятность обнаружения возбудителя составляет 70%), поэтому рекомендуется провести исследование повторно в медицинской лаборатории для подтверждения результата.

Экспресс-тест не оказывает пагубного влияния на организм человека, поэтому противопоказаний к его использованию нет. Стоимость составляет 150-300 рублей, в зависимости от производителя.

При остром хламидиозе эффективно выявить возбудителя позволит общий мазок. Биоматериал у женщин берут из половых органов, шейки матки и из мочеиспускательного канала.

У мужчин делают соскоб из уретры или извлекают секрет простаты. Полученный биоматериал помещают в раствор на основе метанола и ацетона. Через определенное время окрашенные клетки рассматривают под микроскопом и делают вывод о наличии или отсутствии возбудителя хламидиоза в организме пациента.

При хроническом хламидиозе точность определения возбудителя очень мала, потому что этот метод специфичен по отношению к факторам воспаления. Стоимость анализа невелика, часто он входит в услуги ОМС (можно выполнить бесплатно).

Это твердофазный иммуноферментный анализ. Заключается в обнаружении антигена возбудителя хламидиоза в биоматериале человека. Соскоб из уретры или цервикального канала собирают в специальные пробирки для анализа, изготовленные фирмой-производителем.

Материал хранят при заданной температуре (без замораживания). Проведение реакции и интерпретацию результатов осуществляют согласно инструкции к данному набору.

Предварительно проверяют наличие желто-оранжевого окрашивания, которое свидетельствует о наличии хламидий в испытуемой пробе. Для уточнения образцы биоматериалов подвергают спектрофотометрии при длине волны 492 нм.

Анализ считают положительным на С. trachomatis при спектре поглощения равном или выше «cut-off». Этот вид анализа считается неточным (специфичность не более 50-70%).

Методы диагностики сифилиса, гонореи, трихомониаза, хламидиоза

Из-за высокого уровня заболеваемости, наличия соче-танных инфекций урогенитального тракта и др. обстоятельств лабораторная диагностика ИППП занимает доминирующее положение в комплексе врачебных мероприятий.

Принципы лабораторной диагностики ИППП условно делятся на микроскопические, бактериологические (включая культуру клеток), серологические, а также молекулярно-биологические и мало чем отличаются от других заболеваний.

имунноморфологический метод

В последние 10-15 лет в этой области наметился значительный прогресс, приведший к созданию новых подходов и методологии постановки диагноза.

Наиболее распространенными и вызывающие угрозу для здоровья нации, экономические и социальные проблемы являются сифилис, трихомониаз, гонорея и хламиди-оз, уровень заболеваемости которыми в России достигает эпидемического.

Сифилис. Основой лабораторной диагностики, которая зачастую является наиболее достоверной, в России служит комплекс серореакций (КСР), заключающийся в реакции микропреципитации (РМП) с кардиолипиновым антигеном и ее модификации реакции связывания комплемента (РСК) с кардиолипиновым и трепонемным антигенами, а также реакции иммунофлюоресценции (РИФ) и ее модификации (РИФабс и РИФ200), и реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ).

В настоящее время разработаны показания к применению нового КСР: иммуноферментного анализа (ИФА) или реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) в комплексе с РМП и отдельно в качестве отборочных и подтверждающих методов диагностики сифилиса.

Разрабатываются методики, позволяющие провести раннюю диагностику сифилиса, а также врожденного заболевания, рецидивов инфекционного процесса, оценки эффективности терапии, что связано с выявлением IgM, а также детекции антигена (T.pallidum ) при нейросифилисе и серорези-стентности.

Новый серологический комплекс более чувствителен и специфичен, легко воспроизводим, «быстр» в исполнении, менее субъективен в учете результатов и позволяет автоматизировать процесс постановки диагноза и получить более достоверные результаты.

ммуноферментный анализ

Трихомониаз. В силу широкого распространения этого заболевания, возможности малосимптомного течения, тяжести осложнений и др. адекватная лабораторная диагностика весьма важна.

Основные методы исследований трихомониаза: микроскопия нативных и окрашенных по Граму или другими красителями препаратов, куль-туральная (бактериологическая) диагностика на жидких питательных средах.

Серологические исследования (РИФ), используемые в 70-х годах, применяются крайне редко. Разрабатываются методы диагностики, связанные с детекцией Т.vaginalis — ДНК-диагностика (ПЦР-анализ).

Хламидиоз. Хламидиоз — одно из наиболее распространенных в мире инфекционных заболеваний, в России диагностируется, главным образом, с помощью методов иммунофлюоресценции (ПИФ и НПИФ), регламентируемых Приказом МЗ РФ № 286.

ПЦР-анализ нашел широкое применение за рубежом и в России и является весьма чувствительным и специфичным. Однако, существующие в России тест-системы не всегда дают однозначный ответ о наличии (отсутствии) патогенного агента — С.trachomatis.

Метод культуры клеток является высокоэффективным, особенно в первые недели после окончания терапии. Его можно использовать и как критерий излечен-ности.

Дискутируется вопрос и получены предварительные результаты по эффективности использования тест-систем для определения антихламидийных IgM на ранних сроках инфицированное(tm).

кровь из вены

Заслуживает внимания дальнейшее исследование персистенции и латентного течения инфекционного процесса, что, возможно, отчасти объяснит неудачи терапии хламидийной инфекции урогенитального тракта.

Гонорея. Лабораторная диагностика гонореи в последние годы мало изменилась: микроскопия мазков, окрашенных по Граму, и бактериологическое исследование отделяемого пациентов.

Существующие приказы МЗ регламентируют использование культуральной диагностики у детей, беременных, а также при хроническом течении патологического процесса.

ДНК-диагностика N.gonorrhoeae осуществляется редко и не является регламентированным методом обследования.

Таким образом, существует ряд лабораторных подходов к диагностике ИППП. Целесообразным, но не всегда возможным является комплексная оценка результатов исследования.

Разработка, унификация и сертификация тест-систем, диагностикумов и создание на этой базе регламентированных методов исследования и алгоритма обследования пациентов с подозрением на ИППП позволит оптимизировать терапевтические мероприятия, избежать рецидивов заболевания.

интерпретация анализов

Разрабатываются и внедряются в практику неинвазив-ные методы лабораторной диагностики ИППП, основанные на иммунохроматографических, ферментспецифиче-ских и др. подходах: исследование по моче, слюне и др.

Более подробно о методах диагностики ИППП и научных исследованиях в этой области можно ознакомиться в соответствующих публикациях, а также в диссертациях, защищенных и выполненных в ЦНИКВИ МЗ РФ.

Таблица 1

Классификация методов лабораторной диагностики

патогенных возбудителей ИППП

а) светооптическая, в том числе тамнолольная микроскопия;

б) флуоресцентная микроскопия;

в) электронная микроскопия: трансмиссионная (в том числа, улирацитохимия), сканирующая — используется главным образом для научных исследований.

а) комплекс серологических реакций (КСР): реакция микропреципитации (РМП) и реакция связывания комплемента (РСК);

в) реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ) и ее модификации;

г) реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) и ее модификации;

д) иммуноформонтный анализ (ИФА) и его модификации.

3. Культуральные, вт.ч. культура клеток.

4. Молекулярно-биологические: ДНК-гибридизация, ЦПР-анализ, ЛЦР-анализ.

5. Иммунохроматографические и ферментоспецифические (скрининговые).

Недостатки метода

Иногда результаты анализов бывают ложными, что считается одним из минусов данного исследования. Ложноотрицательный анализ может быть из-за нарушений в правилах забора исследуемого материала.

Ложноположительные чаще всего проявляются на фоне других, сочетающихся с хламидиозом инфекционных заболеваний половой сферы. К таким помехам приводит присутствие иной микрофлоры.

Данный метод сложен для малоопытных работников лаборатории и не всегда точен. Кроме этого, с помощью него трудно подвести итоги терапии. Вероятность выявления урогенитального хламидиоза составляет не более 50%.

Интерпретация результатов ИФА

Расшифровку ИФА проводит специально обученный специалист, но нередко на руки к пациенту попадают результаты анализов, разобраться в которых достаточно сложно.

  • Выявление в ИФА IgM – свидетельствует о начале острой фазы заболевания (эти иммуноглобулины определяются в крови только в первые 5 суток заболевания).
  • Ig А – выявляются при остром хламидиозе, свидетельствуют о наличии воспалительного процесса в организме.
  • IgG – свидетельствуют о том, что хламидиоз перешел в хроническую стадию.

Одновременно выявление иммуноглобулинов A и G говорит о том, что у больного обострение хронической инфекции.

Транскрипционная амплификация – это исследование с помощью описания мельчайших молекулярных следов хламидий

При ИФА стоит обращать внимание еще и на такое понятие, как титр антител. Чем выше это число, тем больше антител в крови, а значит – выше количество возбудителей болезни в организме.

Ни экспресс-тест, ни ИФА не являются 100% точным методом определения хламидий, только врач может оценить состояние больного, имеющиеся противопоказания и назначить соответствующее лечение.

Полимеразная цепная реакция – анализ на хламидиоз методом выявления ДНК считается самым чувствительным методом диагностики на сегодняшний день. Он позволяет выявить заболевание, протекающее бессимптомно, при самых малых количествах хламидий в организме больного.

Для проведения ПЦР нужно сдать мазок биологического материала. Для этого берется соскоб из уретры, с конъюнктивы, секрет простаты, сперма у мужчин или выделения шейки матки у женщин.

Бактериологический мазок из влагалища

Полученный материал в специальных пробирках доставляется в лабораторию, где проводится обнаружение ДНК хламидии. Достаточно попадания нескольких возбудителей в соскоб для того, чтобы стало ясно есть хламидиоз у исследуемого или нет, и нужно ли проводить лечение.

Транскрипционная амплификация – новый метод, который позволит с 99% точностью определять есть возбудители хламидиоза в организме у мужчин и женщин или нет.

Для этого будет проводиться поиск рибосомной РНК хламидии в соскобах из половых органов. К сожалению, пока этот метод еще не прошел все клинические испытания и широко не используется.

Хламидиоз остается одним из самых распространенных заболеваний, передающихся половым путем. Не стоит недооценивать опасность внутриклеточных паразитов, лечение хламидиоза у мужчин и женщин должно быть обязательно проведено во всех случаях обнаружения паразитов.

Современные методы диагностики почти в 100% случаев позволяют обнаружить хламидии в организме больного, даже если видимых проявлений болезни нет. Каждый человек, ведущий половую жизнь, должен регулярно обследоваться на хламидиоз, для этого необходимо узнать сколько стоит обследование, где можно сдать мазок или хотя бы регулярно покупать экспресс-тест в аптеке.

Особое внимание стоит уделить ИФА. Хотя это и достаточно эффективный метод, но у него сложная расшифровка. Поэтому для желающих разобраться поясняем самое основное.

Структурная схема Anti-Сhlamydia trachomatis IgM

При подозрении на хламидиоз ИФА чаще используют как уточняющий анализ, а не как самостоятельный. По тому, какие типы антител выявит ИФА, можно судить о давности заражения и стадии хламидиоза:

  • Anti-Сhlamydia trachomatis IgM — появляются спустя неделю после заражения, и исчезают — спустя 2-3 месяца; положительные IgM — это самый ранний признак заражения хламидиозом;

  • Anti-Сhlamydia trachomatis IgA — появляются в крови через две недели после заражения и исчезают — спустя два-четыре месяца после успешного лечения. Положительные IgA — это признак активной инфекции (например, острой начальной формы или рецидива хронической болезни);

  • Anti-Сhlamydia trachomatis IgG — появляются спустя три—четыре недели после заражения и сохраняются положительными в течение нескольких лет. Они могут быть как признаком хронического хламидиоза, так и признаком инфекции, которую уже успешно пролечили.

Стадия хламидиоза IgM IgA IgG

Острый хламидиоз (заражение — одну-две недели назад)

Острый хламидиоз (заражение — две-три недели назад)

Острый хламидиоз (заражение — более трех-четырех недель назад)

Обострение давнего хламидиоза

Давний хламидиоз

/- /-

Прошедшее (или проходящее) заболевание

Выздоровление

Уменьшение титра антител в 2-4 раза после проведенного лечения

Уменьшение титра в 4-8 раз через 1-1.5 мес после успешного лечения

Отсутствие хламидиоза или отсутствие антител к нему

Кроме положительных и отрицательных результатов, в описании ИФА можно встретиться с таким понятием, как «титр антител» — это концентрация антител к хламидии в крови пациента.

По титрам антител оценивают эффективность лечения: если титры антител после хламидиоза снизились в 2-4 раза после проведенного лечения, то оно считается эффективным.

Положительные результаты ИФА оцениваются, как серопозитивность по хламидиозу (есть антитела к этой болезни в крови), отрицательные результаты — как серонегативность (антител к хламидиозу в крови нет).

Отрицательные результаты ИФА не гарантируют, что болезни нет: встречаются и такие формы хламидиоза, при которых антитела не вырабатываются. Если по данным ПЦР или бак посева наличие хламидий подтвердилось, то даже при отрицательных результатах ИФА ставят диагноз «хламидиоз».

Появление антител после заражения паразитами наблюдается на 5–20 сутки. Каждый их класс возникает при той или иной стадии недуга.

  • Первичное заражение сопровождается ростом IgM, после него – IgA, и в заключение – IgG.
  • После пятидневного промежутка времени заражения наблюдается появление IgM, они пытаются защитить организм от дальнейшего прогрессирования недуга. С их помощью маркируется острая стадия хламидиоза. На 10 день заражения все IgM в крови достигают своих максимальных вершин. По истечении этого времени они постепенно идут на снижение и сменяются показателями IgA. Некоторый промежуток времени даже могут существовать параллельно. Это служит фактом того, что болезнь прогрессирует.
  • IgA образуются по истечении 10 дней после появления первой симптоматики недуга. Их целью является защита слизистых оболочек от возможного проникновения хламидий в ткани глубже. Большое количество IgAв анализах говорит о том, что высокий местный иммунитет пытается сам справиться с задачей.
  • Приблизительно на 15—20 дни после заражения в крови больше наблюдается IgG, уровень же IgAидет на снижение.
  • Острое течение начальной стадии характерно завышенными показателями IgMи низкими IgG.
  • Повторное инфицирование проявляется быстрым увеличением IgA и IgG. Показатели IgM полностью отсутствуют.
  • Хроническое протекание недуга сопровождается проявлением IgG и IgA с повышенной их концентрацией в течение продолжительного периода.
  • После излечения приблизительно через 45—60 дней в крови не наблюдается IgM и IgA. Показатели IgG же еще на протяжении нескольких лет могут появляться в анализах, со сниженным уровнем в 4—6 единиц.
  • Постоянно видимые IgG говорят о том, что человек переболел хламидиозом.
  • Обострение недуга характерно увеличением IgA и IgG в пару раз.
  • Эффективность терапии можно определить по IgA. Их присутствие в крови после 2-месячной терапии говорит о том, что инфекция не исчезла.

Важно знать, что присутствие антител к хламидиям не может повлиять на стойкость иммунитета против бактерий.

Для интерпретации анализов специалисту требуется от нескольких часов до 2-3 дней в зависимости от выбранного метода.

Расшифровать экспресс-тест можно самостоятельно по изменению окраски полоски. Путем сравнивания ее с эталоном, изображенным в инструкции, делают предположение о наличии возбудителя в организме пациента.

После проведения ПЦР-диагностики делают заключение о том, обнаружен возбудитель или же нет.

В случае иммуноферментного анализа после подсчета количества антигенов специалист определяет степень запущенности инфекции.

Если анализ проводился культуральным методом и включал исследования на чувствительность хламидий к антибиотикам, то в результатах обследования указывают тип и название выделенного микроорганизма, содержание бактерий (в КОЕ/мл), список антибактериальных агентов, активных по отношению к возбудителю (значок S) и тех, к которым хламидии имеют резистентность (значок R).

Для подтверждения результатов рекомендовано проводить полное обследование несколькими методами.

Какой материал берут для анализа на хламидии?

При диагностике хламидиоза используются: моча, кровь из вены, мазок из влагалища или мочеиспускательного канала, соскоб эпителия зараженных органов.

Извлечение биоматериала из организма пациента и подготовка к сдаче анализов имеет свои особенности.

У женщин

В случае взятия проб из влагалища нельзя:

  • мочиться за 2-3 часа до обследования;
  • осуществлять спринцевание за сутки;
  • подмываться перед забором пробы;
  • использовать вагинальные свечи, кремы и другие средства в течение полутора суток до сдачи;
  • применять диуретики или антибактериальные препараты (если курс уже начат, сообщить об этом заранее);
  • сдавать биоматериал во время менструаций.

У мужчин

При заборе анализов из мочеиспускательного канала мужчины нельзя:

  • мочиться в течение 3 часов до обследования;
  • использовать дезинфицирующие средства, делать промывание уретры;
  • мыться антибактериальным мылом;
  • применять антибиотики (в случае использования предупредить об этом специалиста, выполняющего извлечение материала);
  • заниматься сексом за сутки до взятия пробы.

Мазок выполняют стерильным ватным тампоном, для соскоба используют зонды. Анализы из половых органов у мужчин берет врач-уролог, у женщин – гинеколог.

Полимеразная цепная реакция (ЦПР)

Этот метод помогает выявить фрагменты ДНК бактерии в материале для анализов. Это исключает возможность перепутать данное заболевание с другой инфекцией.

Его эффективность наблюдается во всех стадиях. Результат исследований известен уже через пару суток. Материал берется из всех возможных очагов заражения.

Случаются ложноположительные результаты. Их причиной могут послужить нарушения в заборе материала, его транспортировке и во время самого исследования.

На данном этапе этот метод считается самым высокоэффективным. Его точность – 100%.

Микробиологический метод

Он помогает определить хламидии и выбрать антибиотик, к которому они проявляют чувствительность.

Для проведения данного метода необходимо в лаборатории высеять материал для исследования и вырастить его. Процесс этот трудоемкий и дорогостоящий, требует высокой квалификации лаборантов.

Из минусов, кроме трудоемкости и дороговизны метода, считается длительность его проведения. Результат можно узнать только через неделю. Точность исследования – 90%.

Экспресс-диагностика

https://www.youtube.com/watch?v=videoseries

Она включает в себя ферментспецифическую реакцию и иммунохроматографию. Результаты данного анализа можно узнать уже через 20 минут после забора материала, но точность его составляет всего 25%.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями: